[Khóa luận tốt nghiệp] Nghiên cứu tách dòng và thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa petase

Số trang: 59      Loại file: pdf      Dung lượng: 1.11 MB      Lượt xem: 389      Lượt tải: 0

Thành viên thường xem thêm

Thông tin tài liệu

MỤC LỤC
LỜI CAM ĐOAN  ...................................................................................................  I
LỜI CẢM ƠN  ...................................................................................................... II
MỤC LỤC  ...........................................................................................................  III
DANH MỤC BẢNG  ...........................................................................................  VI
DANH MỤC HÌNH  ...........................................................................................  VII
DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT  .................................................................  VIII
TÓM TẮT  ...........................................................................................................  IX
I.  MỞ ĐẦU  .........................................................................................................  1
1.1.  ĐẶT VẤN ĐỀ  .............................................................................................  1
1.2.  MỤC ĐÍCH  ..................................................................................................  2
1.3.  YÊU CẦU  ....................................................................................................  2
II.  TỔNG QUAN TÀI LIỆU  ............................................................................  3
2.1.  Nhựa  .............................................................................................................  3
2.1.1.  Khái niệm  ..................................................................................................  3
2.1.2.  Phân loại nhựa  ..........................................................................................  3
2.1.3.  Khái niệm nhựa PET  ................................................................................  6
2.1.4.  Lịch sử và quá trình thương mại hoá PET  ................................................  6
2.1.5.  Tính chất của nhựa PET  ...........................................................................  7
2.1.6.  Ưu và nhược điểm của nhựa PET  .............................................................  8
2.1.7.  Tình hình sử dụng nhựa trên thế giới và Việt Nam  ..................................  9
2.1.7.1.  Trên thế giới  ..........................................................................................  9
2.1.7.2.  Tại việt nam  .........................................................................................  11
2.1.7.3.  Phân tích về ô nhiễm rác thải nhựa tại Việt Nam  ................................  12
2.1.8.  Tái chế nhựa PET  ...................................................................................  13
2.2.  PETASE  .....................................................................................................  15
2.2.1.  Tìm hiểu chung  .......................................................................................  15
2.2.2.  Cấu trúc không gian của PETASE  .........................................................  16 
iv
2.3.  Ảnh hưởng của petase đến bề mặt nhựa PET  ............................................  18
2.4.  Sự khác nhau giữa enzyme PETASE VÀ MHETASE..............................  19
III.  VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU  ...................................  22
3.1.  Thời gian và địa điểm nghiên cứu  .............................................................  22
3.1.1.  Thời gian nghiên cứu  ..............................................................................  22
3.1.2.  Địa điểm nghiên cứu  ...............................................................................  22
3.1.3.  Đối tượng nghiên cứu  .............................................................................  22
3.1.4.  Nội dung nghiên cứu  ..............................................................................  22
3.1.5.  Sơ đồ nghiên cứu chung  .........................................................................  22
3.2.  Vật liệu, hoá chất, thiết bị, máy móc  .........................................................  23
3.2.1.  Vật liệu  ....................................................................................................  23
3.2.2.  Hoá chất, thiết bị, máy móc  ....................................................................  23
3.3.  Phương pháp  ..............................................................................................  24
3.3.1.  Định lượng DNA trong mẫu  ...................................................................  24
3.3.3.  Tách dòng gen mã hoá PETASE  ............................................................  26
3.3.4.  Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào E.coli bằng phương pháp sốc nhiệt  ...  27
3.3.5.  Tách chiết dna plasmid từ các tế bào E.coli  ...........................................  28
3.3.6.  Điện di phát hiện DNA trên gel agarose  ................................................  29
3.3.7.  Tách chiết DNA ra khỏi gel agarose  ......................................................  29
3.3.8.  Thiết kế vector biểu hiện gen mã hoá cho PETASE  ..............................  30
3.3.9.  Biểu hiện PETASE ở E.coli ...................................................................  31
IV.  KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN  ...................................................................  33
4.1.  Tách dòng gen mã hoá cho PETASE  ........................................................  33
4.1.1.  Nhân gen mã hoá cho PETASE bằng kỹ thuật PCR  ..............................  33
4.1.2.  Tách dòng gen mã hoá cho PETASE  .....................................................  34
4.1.3.  Kết quả xác định trình tự gen mã hoá cho PETASE  ..............................  37
4.2.  Biểu hiện PETASE tái tổ hợp  ....................................................................  39
4.2.1.  Thiết kế vector biểu hiện PETASE – pET22b(+)...................................  39
4.2.2.  Biểu hiện PETASE tái tổ hợp  .................................................................  42 
v
V.  KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ  ...................................................................  44
5.1.  KẾT LUẬN  ................................................................................................  44
5.2.  KIẾN NGHỊ  ...............................................................................................  44
TÀI LIỆU THAM KHẢO  ...................................................................................  45
PHỤ LỤC  ............................................................................................................  48
Xem thêm


Giao dịch viên QHKH Cá nhân-RM Hỗ trợ tín dụng Thực tập sinh Agribank - NH Nông nghiệp & PTNT BIDV - NH Đầu tư phát triển VN Vietinbank - NH Công thương VN Vietcombank (VCB) - NH Ngoại thương VN LienVietPost Bank (LVPB) - NH Bưu Điện Liên Việt MB Bank - NH Quân Đội Techcombank - NH Kỹ Thương Tổng cục Thống kê
Nhắn cho chúng tôi